生物實驗問題


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請問有沒有學長姐知道,

PCR,電泳,DGGE,

以上三種實驗的原理

我需要詳細的解釋及步驟,可以的話,請提供用高中生可以理解的講法來說明。

查了網路的資料,還是有點不太懂......*-*:|

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  • 1 year later...

PCR( Polymerase chain reaction )所謂的聚合酶連鎖反應

是將微量的DNA片段於短時間內大量複製的方式

而PCR之所以能被廣泛應用 重點在於耐高溫的DNA聚合酶被發現了 也就是自溫泉細菌中純化的Taq聚合酶 

將目標DNA、DNA聚合酶、DNA引子(人工合成)、4種核甘酸(dNTP)放入試管 藉由溫度的改變使DNA自動進行複製

step1:分離目標DNA的兩股

將其加熱至90~95度 使高溫將連接兩條DNA鏈的氫鍵打斷來分離兩股

step2:黏合引子對

將溫度降至50~60度左右 使特定序列的引子與單股DNA上的鹼基配對黏合

step3:目標DNA複製

將溫度升至72度左右 使DNA聚合酶從引子處開始複製 

 

 

 

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基本上電泳就是利用電流驅使帶電樣本移動 而因為樣本分子不完全相同的物理性質在凝膠中有不同的移動速率 並藉此分離樣本的方式

依照是否有含支持物 以及支持物種類的不同分成許多電泳方式 對應的樣本成分也有所差異

你想問的"電泳"是哪種呢?

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DGGE我沒有實際操作過 

我之前做的是瓊酯凝膠電泳 

據我查網上資料理解 DGGE應該是在凝膠成分上比較特殊

關於這部分不是很了解 (´;ω;`)

但如果你想了解瓊酯凝膠電泳我可以解釋給你聽~

以上言論如有謬誤

還望各位高手不吝指點及糾正錯誤(ㅅ˘ㅂ˘)

 

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